EKSPRESI GEN ASTAXANTHIN PADA HAEMATOCOCCUS PLUVIALIS DENGAN INDUKSI NaCl DAN INTENSITAS CAHAYA TINGGI

Abstract

H. pluvialis merupakan mikroalga uniseluler yang mampu menghasilkan astaxanthin hingga 5% berat kering dalam kondisi stress. Astaxanthin mempunyai aktivitas utama sebagai antioksidan sehingga banyak dimanfaatkan dibidang kesehatan. Maka dari itu, diperlukan upaya untuk meningkatkan kadar astaxanthin pada H. pluvialis. Beberapa upaya yang dapat dilakukan yaitu penambahan induksi kimia dan fisika serta kombinasi keduanya. Ketika produktivitas astaxanthin meningkat berpengaruh pada gen-gen yang terlibat dalam biosintesis astaxanthin. Peningkatan kadar tersebut berkaitan dengan tujuan penelitian ini yaitu mengetahui pengaruh ekspresi gen (crtR-b) β-karoten hidroksilase terhadap produksi astaxanthin pada mikroalga H. pluvialis yang diinduksi dengan penambahan NaCl dan intensitas cahaya tinggi menggunakan metode Polymerase Chain Reaction (PCR) gel base. H. pluvialis dikultivasi menggunakan media Guillard selama 7 hari. Pada hari ke-8, kultur diberikan perlakuan induksi NaCl 0,8%, dipaparkan cahaya 6800 lux, kombinasi antara keduanya, serta tanpa diberikan perlakuan apapun sebagai kontrol negatif. Metode ekstraksi yang digunakan yaitu maserasi menggunakan DMSO (Dimetil Sulfoksida) yang kemudian dilakukan pengukuran kadar astaxanthin menggunakan spektrofotometer pada 𝜆 490 nm. Hasil pengukuran kadar astaxanthin menunjukan kadar tertinggi dihasilkan oleh kultur dengan induksi NaCl 0,8% sebanyak 3,111 mg/L. Metode yang digunakan untuk amplifikasi gen yaitu PCR gel-base dengan hasil nilai AUC tertinggi 22711,72 dihasilkan oleh kultur dengan induksi NaCl 0,8%.